miércoles, 26 de septiembre de 2012

INTERPRETACION DE RESULTADOS 
 
Las proteínas fijadas en geles de poliacrilamida se observan como bandas azules de diferentes pesos moleculares.

Puede ser determinado comparando la banda con un patrón de proteínas estándar de peso conocido denominado marcador de peso molecular.

La distribución de las proteínas depende de la concentración del gel, por lo tanto, el operador deberá seleccionar el marcador de peso molecular más adecuado.
Algunas proteínas suelen migrar anómalamente y muchas veces aparecen con un mayor peso del esperado 
Las proteínas degradadas (desnaturalización de las proteínas por causa de un agente químico catalizador, ejm: proteasas)
 
NOTA: suelen dejar manchas difusas en todo el frente de corrida y a veces suelen confundirse   con proteínas de menor peso molecular
        El peso molecular de una proteína se mide en kilodaltons (Equivalente a 1 000 Daltons)
 Una explicacion paso a paso de la electroforesis.
 
 
 

                          ELECTROFORESIS

La electroforesis es una técnica para la separación de moléculas según la movilidad de estas en un campo eléctrico.



FUNDAMENTOS DE LA TÉCNICA. 
Alta sensibilidad, resolución y versatilidad.
Método de separación de
– Ácidos nucleicos, Proteínas, Otras biomoleculas
Entrega criterio de pureza
Separa mezclas complejas



CLASES DE ELECTROFORESIS
.Electroforesis en geles de gradientes
Electroforesis en geles de agarosa
Electroforesis capilar
Isoelectroenfoque
Electroforesis bidimensional
Electroforesis en gel poliacrilamida


REACTIVOS
TAE (Tris+acetico+EDTA): permite mantener las moléculas de DNA con una carga negativa uniforme y constante.
Tris:es el agente tamponante que mantiene el pH.
EDTA: secuestro  DE Mg++ evita la degradación del DNA durante la preparación y la electroforesis.
Azul de bromofenol: marca el "frente de avance". permite detener la electroforesis con la confianza de que las moléculas han sido capturadas.
Xileno-cianol:  permite detener la electroforesis con la confianza de que las moléculas grandes de DNA no se hayan salido del gel.




AQUÍ LES DEJO UN MUY BUEN VÍDEO QUE MUESTRE PASO A PASO LA ELECTROFORESIS